Alla vet att det finns många labb, så hur många känner till PCR-labb? Och vilka är de grundläggande kraven för att utforma PCR-labb? Sedan kommer det att finnas VOLAB Xiaobian att diskutera med alla~
1, PCR-laboratorielayout
PCR-amplifieringstestlaboratoriet är i princip uppdelat i fyra separata arbetsområden: reagenslagring och beredningsområde, provberedningsområde, beredning av amplifieringsreaktionsblandning och amplifieringsområde samt analysområde för amplifieringsprodukt. För att undvika kors-kontamination måste inträde i varje arbetsområde strikt följa en enda riktning, det vill säga endast från området för reagenslagring och beredning → provberedningsområde → beredning av amplifieringsreaktionsblandning och amplifieringsområde → analysområde för amplifieringsprodukt. Reagens- och provöverföring mellan varje experimentzon bör utföras genom ett överföringsfönster.
2. Design av ventilationssystem för laboratorieluftkonditionering och tryckkontroll
PCR-laboratorier har inga strikta reningskrav, men för att undvika risken för kors-kontamination mellan de olika experimentområdena är det lämpligt att använda ett luftfördelningssystem med full-flöde. Samtidigt bör andelen sändning och utmattning kontrolleras strikt för att säkerställa tryckkraven för varje experimentområde.
2.1, provberedningsområde
De huvudsakliga verksamheterna inom detta område är bevarande av prover, extraktion av nukleinsyror (RNA, DNA), lagring och tillsättning av dessa till amplifieringsreaktionsrör och bestämning av DNA-syntes. Tryckgradientkraven i detta område är: positivt tryck i förhållande till det angränsande området för att undvika aerosolkontamination från det intilliggande området in i detta område. Dessutom, på grund av risken för aerosol-inducerad kontaminering under lastningsoperationen, bör onödig promenad i området undvikas.
2.2. Reagensförvaring och beredningsområde
Huvudoperationerna inom detta experimentella område är beredning av lagringsreagens, dispensering av reagens och beredning av huvudreaktionsblandningar. Reagenser och material som används för provberedning ska skickas direkt till detta område och får inte passera genom andra områden. Reagensråmaterial måste förvaras i detta område och beredas i området till de nödvändiga lagringsreagenserna. Det finns inga strikta krav för kontroll av lufttrycket.
2.3, amplifieringsproduktanalysområde
Huvudoperationen i detta område är bestämning av amplifierade fragment. Detta område är den huvudsakliga källan till kontaminering av den förstärkta produkten. Därför är tryckgradientkraven för detta område: Negativt tryck i förhållande till det intilliggande området för att undvika diffusion av förstärkta produkter från området till andra områden.
2.4, beredning av amplifieringsreaktionsblandning och amplifieringszon
Huvudoperationen inom detta område är DNA-amplifiering. Dessutom kan tillägget av den preparerade DNA-mallen (från provberedningsområdet) och huvudreaktionsblandningen (från reagenslagrings- och beredningsområdet) för att framställa en reaktionsblandning etc. också utföras i detta område. Tryckgradientkraven i detta område är: negativt tryck i förhållande till det intilliggande området för att undvika aerosolläckage från området. För att undvika föroreningar som orsakas av aerosoler bör onödiga promenader i området minimeras. Enskilda operationer såsom provtagning bör utföras i den rena bänken.
3.1. Strikt uppdelning av arbetsområde
(1) Inställningen av varje experimentområde är rimlig;
(2) Varje experimentområde bör ha tydliga märken (såsom slående husnummer eller olika markfärger etc.) för att undvika förväxling mellan utrustning och reagenser i olika experimentområden.
3.2, rimliga systeminställningar
(1) Rimlig inställning av-luftkonditioneringsventilationssystem, försök att använda hela -sänd luftkonditioneringssystemet-;
(2) Strikt luftflödestryckkontroll säkerställer olika tryckkrav i olika experimentområden.
3.3, standardoperationen
(1) Teknikerna vid amplifieringsinspektionslaboratoriet måste utföra-jobbträning och kan endast delta i kliniska genamplifieringstester efter att ha klarat utbildningen;
(2) Under den experimentella operationen måste operatören bära handskar och byta ut dem ofta. Dessutom är användningen av engångsmössor under drift också en effektiv åtgärd för att förhindra kontaminering;
(3) Rengöringsarbetet är aktuellt och korrekt. Efter att experimentet är avslutat måste området rengöras omedelbart. Förutom de konventionella desinficerande vätskorna för desinfektion av ytor eller bestrålning och desinfektion av ultravioletta lampor, bör viss experimentell utrustning även utsättas för högtryckssterilisering.
3.4, strikt förvaltning
(1) Strikt kontrollera personalen som kommer in i och lämnar laboratoriet. Personer som inte är relaterade till experimentet får inte gå in i eller lämna laboratoriet efter behag och vid behov ska de sätta upp oberoende passager och dörrar till och från hela försöksområdet.
(2) Minimera onödig promenad i experimentområdet för att minska risken för kors-kontamination.
(3) Analysområdet för amplifierad produkt är den viktigaste källan till kontaminering av den amplifierade produkten. Avfallslösningen kan inte dumpas i laboratoriet. Det måste blötläggas i desinfektionslösningen och sedan kasseras på en plats borta från laboratoriet. De använda spetsarna är av engångstyp. Materialen bör också desinficeras och steriliseras och sedan behandlas enhetligt, såsom förbränning;
(4) Området för analys av amplifieringsprodukter kan använda vissa genmutationer och toxiska ämnen, och särskild uppmärksamhet bör ägnas åt säkerhetsskyddet för försöksledaren.
3.5. Kompletta laboratorieanläggningar
Kompletta laboratoriestödjande anläggningar är nödvändiga förutsättningar för att säkerställa det experimentella arbetet. Motsvarande utrustning och instrument bör utrustas i enlighet med det olika experimentella innehållet i varje laboratorium, såsom ultra-rena bänkar, centrifuger och provmatare.